Pass Wieħed Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Cat Nru: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) huwa kit ta 'skoperta veloċi RT-qPCR ibbażat fuq sonda adattat għal PCR kwantitattiv single-plex jew multiplex bl-użu ta' RNA bħala mudell (bħal virus RNA).Dan il-prodott juża ġenerazzjoni ġdida ta 'Taq DNA Polymerase modifikata bl-antikorpi u Reverse Transcriptase ddedikata f'pass wieħed, b'buffer ottimizzat għal amplifikazzjoni rapida, li għandha veloċità ta' amplifikazzjoni aktar mgħaġġla, effiċjenza u speċifiċità ogħla ta 'amplifikazzjoni.Jappoġġja amplifikazzjoni bilanċjata kemm f'single-plex kif ukoll multiplex ta 'kampjuni ta' konċentrazzjoni baxxa u għolja fi żmien qasir.
Komponenti
1. 5×RT-qPCR buffer (U+)
2. Taħlita ta 'enżimi (U+)
Noti:
a.5×RT-qPCR buffer (U+) jinkludi dNTP u Mg2+;
b.Taħlita ta 'enżimi (U+) tinkludi reverse transcriptase, Hot Start Taq DNA polymerase, inibitur ta' RNase u UDG;
c.Uża ponot RNase-Free, tubi EP, eċċ.
Qabel l-użu, ħallat sewwa l-buffer 5×RT-qPCR (U+).Jekk ikun hemm xi preċipitazzjoni wara li tidwib, stenna li l-buffer jerġa 'lura għat-temperatura tal-kamra, ħawwad u ħoll, u mbagħad użahom b'mod normali.
Kundizzjonijiet tal-Ħażna
Il-prodott jintbagħat bis-silġ niexef u jista 'jinħażen f'-25 ~ -15 ℃ għal sena.
Istruzzjonijiet
1. Reazzjoni Sistema
| Komponenti | Volum (20 μL reazzjoni) |
| 2 × RT-qPCR buffer | 4μL |
| Taħlita ta' enżimi (U+) | 0.8μL |
| Primer Forward | 0.1 ~ 1.0μM |
| Primer Reverse | 0.1 ~ 1.0μM |
| TaqMan Probe | 0.05 ~ 0.25μM |
| Mudell | X μL |
| Ilma Ħieles mill-RNase | sa 25μL |
Noti: Il-volum ta 'reazzjoni huwa 10-50μL.
2. Protokoll taċ-ċikliżmu (Sstandard)
| Ċiklu pass | Temp. | Ħin | Ċikli |
| Traskrizzjoni Reverse | 55 ℃ | 10 min | 1 |
| Denaturazzjoni Inizjali | 95 ℃ | 30 sek | 1 |
| Denaturazzjoni | 95 ℃ | 10 sek | 45 |
| Ittemprar/Estensjoni | 60 ℃ | 30 sek |
| Protokoll taċ-ċikliżmu (Mgħaġġel) Ċiklu pass |
Temp. |
Ħin |
Ċikli |
| Traskrizzjoni Reverse | 55 ℃ | 5 min | 1 |
| Denaturazzjoni Inizjali | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denaturazzjoni | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Ittemprar/Estensjoni | 60 ℃ | 10 s |
Noti:
a.It-temperatura tat-traskrizzjoni inversa hija bejn 50℃ sa 60℃, iż-żieda fit-temperatura tgħin biex tkabbar strutturi kumplessi u mudelli ta 'kontenut għoli ta' CG;
b.It-temperatura ottimali ta 'ttemprar jeħtieġ li tiġi aġġustata abbażi tal-valur Tm tal-primer, u agħżel l-iqsar żmien għall-ġbir tas-sinjali tal-fluworexxenza bbażat fuq l-istrument Real Time PCR.
Noti
Jekk jogħġbok ilbes il-PPE meħtieġ, kowt tal-laboratorju u ingwanti bħal dawn, biex tiżgura s-saħħa u s-sigurtà tiegħek!
