Phosphatase Alkaline (ALP)
Deskrizzjoni
Alkaline Phosphatase huwa derivat minn razza E. coli rikombinanti li ġġorr il-ġene TAB5.L-enzima tikkatalizza d-defosforilazzjoni tat-truf 5' u 3' tad-DNA u l-RNA fosfomonoesteri.Barra minn hekk, idrolizza r-ribose, kif ukoll id-deoxyribonucleoside triphosphates (NTPs u dNTPs).TAB5 Alkaline Phosphatase jaġixxi fuq truf 5' li jisporġu 'l barra, 5' minquxa u ċatt.Il-Phosphatase jista 'jintuża f'ħafna applikazzjonijiet ta' bijoloġija molekulari, bħall-klonazzjoni jew it-tikkettar tat-tarf tas-sonda biex jitneħħew it-truf fosforilati tad-DNA jew RNA.F'esperimenti ta 'klonazzjoni, id-defosforilazzjoni tipprevjeni lid-DNA tal-plasmid linearizzat mill-awto-ligazzjoni.Jista' wkoll jiddegrada dNTPs mhux inkorporati fir-reazzjonijiet tal-PCR biex jipprepara mudell għas-sekwenzjar tad-DNA.L-enzima tiġi inattivata kompletament u b'mod irriversibbli billi tissaħħan f'70°C għal 5 minuti, u b'hekk it-tneħħija tal-fosfatażi qabel il-ligazzjoni jew it-tikkettar tat-tarf ma tkunx meħtieġa
Użu
1.Alkaline phosphatase akkoppjat ma 'proteini (antikorpi, streptavidin eċċ,) jistgħu jidentifikaw speċifikament molekuli fil-mira, u jistgħu jintużaw fl-ELISA, WB u sejbien istokimiku;
2.Alkaline phosphatase jista 'jintuża biex jiddefosforizza l-5 '-terminal tad-DNA jew RNA biex jipprevjeni l-awto-linking;
3.Id-DNA jew RNA defosforilati ta 'hawn fuq jistgħu jiġu ttikkettjati minn fosfati radju-tikkettati (permezz ta' T4 poly-nucleotide kinase)
Struttura Kimika
Speċifikazzjoni
| Oġġetti tat-Test | Speċifikazzjonijiet |
| Attività Enżima | 5U/μL |
| Attività Endonuclease | Mhux misjuba |
| Attività Exonuuclease | Mhux misjuba |
| Attività ta' Nicking | Mhux misjuba |
| Attività RNase | Mhux misjuba |
| E.coli DNA | ≤1kopja/5U |
| Endotossina | LAL-Test, ≤10EU/mg |
| Purità | ≥95% |
Trasport u ħażna
Trasport:AmbIent
Ħażna:Aħżen f'2-8°C
Test mill-ġdid rakkomandatĦajja:2 snin
