Bst 2.0 DNA Polymerase (Ħieles minn glycerol, densità għolja)
Bst DNA polymerase V2 hija derivata minn Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, li għandha attività ta 'DNA polymerase 5′→3′ u attività qawwija ta' sostituzzjoni tal-katina, iżda l-ebda attività exonuclease 5′→3′.Bst DNA Polymerase V2 huwa idealment adattat għal strand-splacement, amplifikazzjoni iżotermika LAMP (amplifikazzjoni isotermika medjata minn Loop) u sekwenzar rapidu.Din il-polimerażi tad-DNA Bst V2 hija kapaċi tinibixxi l-attività tal-polimerażi tad-DNA f'temperatura tal-kamra, sabiex tkun tista 'titħaddem u s-sistema ta' reazzjoni tista 'tiġi fformulata f'temperatura ambjentali, tevita amplifikazzjoni mhux speċifika u ttejjeb l-effiċjenza tar-reazzjoni, u din il-verżjoni tista' tkun lajofilizzata.Barra minn hekk, huwa kapaċi li jirrilaxxa l-attività tiegħu f'temperaturi elevati, u b'hekk telimina l-ħtieġa għal pass ta 'attivazzjoni separat.
Komponenti
| Komponent | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA polymerase V2 (Mingħajr gliċerol) (32U/μL) | 0.05 mL | 0.25 mL | 2.5 mL |
| 10 × HC Bst V2 Buffer | 1.5 mL | 2 × 1.5 mL | 3 × 10 mL |
| MgSO4 (100mM) | 1.5 mL | 2 × 1.5 mL | 2 × 10 mL |
Applikazzjonijiet
1.Amplifikazzjoni iżotermika LAMP
2.Reazzjoni ta' spostament wieħed tal-fergħa tad-DNA
3.Sekwenzar tal-ġeni GC għoli
4.Sekwenzar tad-DNA tal-livell nanogramma.
Kundizzjoni tal-Ħażna
Trasport taħt 0°C u jinħażen f'-25°C~-15°C.
Definizzjoni ta' Unità
Unità waħda hija definita bħala l-ammont ta 'enżima li tinkorpora 25 nmol ta' dNTP f'materjal li ma jinħallx fl-aċidu fi 30 minuta f'65°C.
BOZZA Reazzjoni
| Komponenti | 25 μLSistema |
| 10 × HC Bst V2 Buffer | 2.5 μL |
| MgSO4 (100mM) | 1.5 μL |
| dNTPs (10mM kull wieħed) | 3.5 μL |
| SYTO™ 16 Aħdar (25×)a | 1.0 μL |
| Primer taħlitab | 6 μL |
| Bst DNA Polymerase V2 (Mingħajr gliċerol) (32 U/uL) | 0.25 μL |
| Mudell | × μL |
| ddH₂O | Sa 25 μL |
Noti:
1) a.SYTOTM 16 Green (25×): Skont il-ħtiġijiet sperimentali, żebgħa oħra jistgħu jintużaw bħala sostituti;
2) b.Taħlita tal-primer: miksuba billi tħallat 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB u volumi oħra.
Reazzjoni u Kundizzjoni
1 × HC Bst V2 Buffer, it-temperatura ta 'inkubazzjoni hija bejn 60°C u 65°C.
Inattivazzjoni tas-Sħana
80°C, 20mins.
