Reaġent tar-Rilaxx tal-Kampjun
Reaġent tar-Rilaxx tal-Kampjun huwa għal xenarji dijanjostiċi POCT molekulari.Għaż-żewġ sistemi ta 'LAMP ta' amplifikazzjoni diretta u PCR ta 'amplifikazzjoni diretta, m'hemmx bżonn ta' estrazzjoni ta 'aċidu nuklejku.Il-lisat mhux raffinat tal-kampjun jista 'jiġi amplifikat direttament, il-ġene fil-mira jista' jiġi skopert b'mod preċiż, il-ħin ta 'skoperta tal-kampjun jista' jitqassar aktar, li jaqbel perfettament mar-rekwiżiti tal-applikazzjoni tal-POCT molekulari.Huwa adattat għal tampuni nażali, tampuni tal-griżmejn u tipi oħra ta 'kampjuni.Il-kampjuni pproċessati jistgħu jintużaw direttament għal PCR kwantitattiv ta 'fluworexxenza f'ħin reali jew skoperta LAMP, u l-istess riżultati bħal metodi ta' estrazzjoni konvenzjonali jistgħu jinkisbu mingħajr operazzjonijiet ta 'estrazzjoni ta' aċidu nuklejku kkumplikati.
Kundizzjonijiet tal-Ħażna
Trasport u aħżen f'temperatura ambjentali.
Kontroll tal-kwalità
Sejbien funzjonali - qPCR kwantitattiv: Is-sistema ta' Reaġent ta' Rilaxx tal-Kampjun ta' 800μl ġiet amplifikata
b'1000 kopja Novel Pseudovirus, kampjun wieħed ta' swab nażali, li jirriżultaw kurvi ta' amplifikazzjoni simili uValuri ΔCt fi ħdan ± 0.5 Ct.
Proċedura Sperimentalires
1. Ħu 800 μl Reaġent tar-Rilaxx tal-Kampjun u ferrex is-soluzzjoni tal-liżi f'tubu tal-kampjuni ta' 1.5 mL
2. Ħu l-imnieħer jew it-tampun tal-griżmejn bit-tampun;Proċedura tat-teħid tal-kampjuni tal-imnieħer: ħu t-tampun sterili u poġġih fl-imnifsejn, bil-mod avvanza għal madwar 1.5 ċm fond, dawwar bil-mod 4 darbiet kontra l-mukoża tal-imnieħer għal aktar minn 15-il sekonda , imbagħad irrepeti l-istess operazzjoni fuq il-kavità nażali l-oħra bl-istess swab.Proċedura ta 'teħid ta' kampjuni ta 'tampuni tal-gerżuma: ħu t-tampuni sterili u bil-mod, imsaħ malajr it-tunsilli farinġi u l-ħajt farinġali ta' wara 3 darbiet.
3.Poġġi t-tajjara immedjatament fit-tubu tal-kampjun.Ir-ras tat-tampuni għandha tkun imdawra u mħallta fis-soluzzjoni tal-ħażna għal mill-inqas 30 sekonda biex jiġi żgurat li l-kampjun jiġi eluwit għal kollox fit-tubu tal-kampjun.
4. Inkubazzjoni f'temperatura tal-kamra (20 ~ 25 ℃) għal 1min, il-preparazzjoni tal-liżi buffer titlesta.
5. Kemm is-sistema 25μl RT-PCR kif ukoll RT-LAMP kienu kompatibbli ma 'ammont ta' 10μl ta 'żieda ta' mudell għal esperimenti ta 'skoperta.
Noti
1. L-ammont minimu ta 'lisat dirett tal-kampjun li jikkorrispondi għal swab wieħed jista' jiġi aġġustat għal 400μl, li jista 'jiġi aġġustat skont il-ħtiġijiet tal-ittestjar.
2. Ladarba l-kampjun jiġi pproċessat mir-reaġent tar-rilaxx tal-kampjun, huwa rakkomandat li titwettaq il-fażi li jmiss tat-test kemm jista 'jkun malajr, il-ħin ta' stennija tal-intervall huwa preferibbilment inqas minn siegħa.
3. Il-pH tal-lisat tal-kampjun huwa aċiduż, u s-sistema ta 'skoperta jeħtieġ li jkollha ċertu buffer.Huwa adattat għall-biċċa l-kbira tal-kxif tal-fluworexxenza tal-PCR, RT-PCR u LAMP b'buffer tal-pH, iżda mhux adattat għall-iskoperta kolorimetrika tal-LAMPA mingħajr buffer.
