Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Deskrizzjoni
Cat Nru: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix huwa Kit PCR kwantitattiv multiplex ibbażat fuq RNA bħala mudell.Fl-esperiment, traskrizzjoni inversa u PCR kwantitattiv jitwettqu fl-istess tubu ta 'reazzjoni, jissimplifikaw l-operazzjoni sperimentali u jnaqqas ir-riskju ta' kontaminazzjoni.Id-disinn uniku ta 'buffer u taħlita ta' enzimi jista 'jintuża f'sistema lajofilizzata ta' pass wieħed.Il-kit juża Reverse Transcriptase reżistenti għas-sħana għal sinteżi effiċjenti tal-ewwel linja cDNA bl-użu ta 'hotstart Taq DNA Polymerase għal amplifikazzjoni kwantitattiva.Fiha buffer ta 'reazzjoni ottimizzat, taħlita ta' enzimi eċċ., U fatturi li effettivament jinibixxu amplifikazzjoni PCR mhux speċifika u jtejbu l-effiċjenza ta 'amplifikazzjoni ta' reazzjonijiet qPCR multipli ġew miżjuda, li jippermettu amplifikazzjoni kwantitattiva ta 'fluworexxenza multipla filwaqt li jiżguraw l-effiċjenza ta' amplifikazzjoni ta 'primers.
Komponenti
| Isem |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Taħlita ta 'Lyo-Enzyme |
| 3. Lyo protettiv |
Kondizzjoni tat-trasportjone
A: Lyo-buffer u protettiv: -25 ~ -15 ℃, il-ħajja fuq l-ixkaffa hija ta 'sena.
B: Taħlita ta 'Lyo-enzyme, 2-8 ℃, il-ħajja fuq l-ixkaffa hija 6 xhur.
Istruzzjoni għall-operat
1. Sistema ta 'Reazzjoni (Ħu 25μL bħala eżempju)
| Komponenti | Volum (μL) | Konċentrazzjoni Finali |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Taħlita ta' Lyo-Enzyme | 1 | - |
| Lyo-Protettant | 8 | - |
| Primer Taħlita (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
| Taħlita ta' Sonda (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| Mudell RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | Sa 25 | - |
2. Protokoll ottimizzat taċ-ċikliżmu
1) Protokoll Standard taċ-Ċikliżmu
| Stadju ta' reazzjoni | Temperatura | Ħin | Ċiklu | |
| 1 | Traskrizzjoni inversa | 50°Ca | 10min | 1 |
| 2 | Denaturazzjoni inizjali | 95°C | 5min | 1 |
| 3 | Reazzjoni ta' amplifikazzjoni | 95°C | 15sec | 45 ċiklu |
| 60°Cb | 30secc |
2) Protokoll Fast Cycling
|
| Stadju ta' reazzjoni | Temperatura | Ħin | Ċiklu |
| 1 | Traskrizzjoni inversa | 50°Ca | 2min | 1 |
| 2 | Denaturazzjoni inizjali | 95°C | 2sec | 1 |
| 3 | Reazzjoni ta' amplifikazzjoni | 95°C | 1sek |
45 ċiklu |
| 60°Cb | 13secc |
Nota:
a) Reverse traskrizzjoni: It-temperatura tista 'tagħżel 42°C jew 50°C għal 10-15-il minuta.
b) Reazzjoni ta' amplifikazzjoni: It-temperatura hija aġġustata skond il-valur Tm tal-primers iddisinjati.
c)Fluworexxenza sinjal akkwist: Jekk jogħġbok issettja l-proċedura sperimentali skont ir-rekwiżiti tal-manwal tal-istrument.
Informazzjoni Teknika/Speċifikazzjonijiet
| Bidu sħun | Mibnija fil-bidu sħun |
| Metodu ta 'skoperta | Sejbien tal-primer-sonda |
| Metodu PCR | Pass wieħed RT-qPCR |
| Tip ta' kampjun | RNA |
Noti
1. Dan il-prodott huwa għal użu ta 'riċerka biss.
2. Jekk jogħġbok ilbes il-PPE meħtieġ, kowt tal-laboratorju u ingwanti bħal dawn, biex tiżgura s-saħħa u s-sigurtà tiegħek!
