2 × PCR Super Mix (b'Żebgħa)
2 × PCR Master Mix fih Taq DNA Polymerase, dNTPs, u komponenti oħra meħtieġa mill-PCR.Il-Master Mix huwa stabbli għal 3 xhur f'4℃ bl-istabbilizzaturi personalizzati tagħna.Is-soluzzjoni tat-taħlita minn qabel hija ottimizzata għal PCR konvenzjonali u lesta għall-użu billi żżid mudell tad-DNA u primers.Il-prodotti tal-PCR jistgħu jitgħabbew direttament għall-elettroforeżi b'żebgħa blu tal-bromophenol mgħobbija minn qabel.Il-prodotti amplifikati fihom sporġenza 3'-dA u jistgħu jiġu kklonati faċilment f'vettur T.It-2×PCR Master Mix tissimplifika l-proċedura tal-PCR u tnaqqas il-kontaminazzjoni.
Kundizzjonijiet tal-Ħażna
Il-prodotti għandhom jinħażnu f'-25 ℃ ~ -15 ℃ għal sentejn.
Speċifikazzjonijiet
| Fedeltà (vs.Taq) | 1× |
| Bidu sħun | No |
| Sporġenza | 3 '-A |
| Polimerażi | Taq DNA Polymerase |
| Format ta' Reazzjoni | SuperMix jew Master Mix |
| Veloċità ta' Reazzjoni | Standard |
| Tip ta' Prodott | Taħlita Master PCR (2x) |
Istruzzjonijiet
1.Sistema ta' Reazzjoni
| Komponenti | Volum(μL) |
| Mudell tad-DNA | Adattat |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| 2 × PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | sa 50 |
2.Protokoll ta' amplifikazzjoni
| Passi taċ-ċiklu | Temperatura (°C) | Ħin | Ċikli |
| Denaturazzjoni inizjali | 94 | 5 min | 1 |
| Denaturazzjoni | 94 | 30 sek | 35 |
| Ittemprar | 50-60 | 30 sek | |
| Estensjoni | 72 | 30-60 sek/kb | |
| Estensjoni finali | 72 | 10 min | 1 |
Nota:
1) Użu tal-mudell: 50-200ng DNA ġenomika;0.1-10ng DNA plasmid.
2) Mg2+konċentrazzjoni: Dan il-prodott fih 3mM ta 'MgCl2, adattat għall-biċċa l-kbira tar-reazzjonijiet PCR.
3) Temperatura ta 'l-ittemprar: Jekk jogħġbok irreferi għall-valur Tm teoretiku ta' primers.It-temperatura ta 'l-ittemprar tista' tiġi ssettjata għal 2-5 ℃ inqas mill-valur teoretiku tal-primer.
4) Ħin ta 'estensjoni: Għal identifikazzjoni molekulari, 30 sek/kb huwa rakkomandat.Għall-klonazzjoni tal-ġeni, 60 sek/kb hija rakkomandata.
Noti
1.Prodotti tal-PCR b'2 × PCR Master Mix mhumiex adattati għall-elettroforesi tal-ġel tal-polyacrylamide.
2.Għas-sigurtà u s-saħħa tiegħek, jekk jogħġbok ilbes kowtijiet tal-laboratorju u ingwanti li jintremew għall-operazzjoni.
3.Jintuża għall-użu tar-riċerka BISS!
