2×HiF Taq flimkien ma Master Mix
Cat Nru: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (Biż-Żebgħa) hija soluzzjoni lesta għall-użu 2 × taħlita minn qabel li fiha Plus HIF DNA Polymerase, dNTPs, u buffer ottimizzat.Żewġ antikorpi monoklonali f'temperatura tal-kamra li jinibixxu l-attività tal-polimerażi u l-attività 3'→5'exonuclease huma miżjuda mat-taħlita prinċipali għal Hot Start PCR faċilment u speċifiku ħafna.Il-fattur ta 'estensjoni huwa miżjud mat-taħlita prinċipali biex tagħti lill-enzima kapaċità ta' amplifikazzjoni ta 'frammenti twal, it-tul ta' l-amplifikazzjoni jista 'jkun sa 13 kb, l-enzima għandha attività ta' polimerażi tad-DNA 5'→3' u 3'→5' Attività exonuclease, il-fedeltà tagħha hija 83 darba dik ta 'Taq DNA polymerase, li hija 9 darbiet dik ta' DNA polymerase ordinarju.Huwa adattat għall-amplifikazzjoni ta 'mudelli kumplessi, il-prodott ta' amplifikazzjoni huwa tarf ċatt.
2×HIF Taq plus Master Mix(With Dye) għandu l-vantaġġi ta 'veloċi u faċli, sensittività għolja, speċifiċità qawwija, stabbiltà tajba, eċċ., Is-sistema ta' reazzjoni teħtieġ biss li żżid primers u mudelli, u tista 'tiġi amplifikata b'żewġ- protokoll tal-pass, li jissimplifika l-passi sperimentali u jiffranka l-ħin.Dan il-prodott fih żebgħa indikaturi tal-elettroforeżi, u l-prodotti tal-PCR jistgħu jintużaw direttament għall-elettroforeżi.Barra minn hekk, il-prodott fih ukoll aġent protettiv speċifiku, sabiex it-taħlita prinċipali tkun tista 'żżomm attività stabbli wara ffriżar-tidwib ripetut.
Kundizzjonijiet tal-Ħażna
Il-prodotti għandhom jinħażnu f'-25 ~ -15 ℃ għal sena.
Speċifikazzjonijiet
| Speċifikazzjoni tal-prodott | Taħlita Master |
| Konċentrazzjoni | 2× |
| Bidu sħun | Mibnija fil-Hot Start |
| Sporġenza | Ċatt |
| Veloċità tar-reazzjoni | Rapidu |
| Daqs (Prodott Finali) | Sa 13kb |
| Kundizzjonijiet għat-trasport | Silġ niexef |
| Tip ta' prodott | Taħlitiet minn qabel ta' PCR ta' fedeltà għolja |
Istruzzjonijiet
1.Sistema ta' Reazzjoni tal-PCR
| Komponenti | Volum (μL) |
| Mudell tad-DNA | Adattat |
| Primer 'il quddiem (10 μmol/L) | 2.5 |
| Reverse Primer (10 μmol/L) | 2.5 |
| 2×HIF Taq flimkien ma Master Mix | 25 |
| ddH2O | sa 50 |
2.Użu rakkomandat ta 'mudelli differenti
| Tip ta' mudell | Amplifika frammenti minn 1kb sa 10 kb |
| DNA ġenomika | 50ng-200 ng |
| Plasmid jew DNA virali | 10pg-20ng |
| cDNA | 1-2.5 µL (Ma taqbiżx 10% tal-volum finali tar-reazzjoni tal-PCR) |
3.Protokoll ta' amplifikazzjoni
1) Protokoll f'żewġ Passi (mudell ta' kumplessità)
| Pass taċ-ċiklu | Temp. | Ħin | Ċikli |
| Denaturazzjoni inizjali | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturazzjoni | 98℃ | 10sec | 30-35 |
| Estensjoni | 68℃ | 30 sek/kb | |
| Estensjoni finali | 72℃ | 5 min | 1 |
2) Protokoll fi Tliet Passi (protokoll regolari)
| Pass taċ-ċiklu | Temp. | Ħin | Ċikli |
| Denaturazzjoni inizjali | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturazzjoni | 98℃ | 10sec | 30-35 |
| Ittemprar | 60℃ | 20 sek | |
| Estensjoni | 72℃ | 30 sek/kb | |
| Estensjoni finali | 72℃ | 5 min | 1 |
3) Protokoll tal-gradjent tal-ittemprar (mudell ta' kumplessità)
| Pass taċ-ċiklu | Temperatura | Ħin | Ċikli |
| Denaturazzjoni inizjali | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturazzjoni | 98℃ | 10 sek | 15 (tnaqqis ta' 1℃ għal kull ċiklu) |
| Ittemprar tal-gradjent | 70-55℃ | 20 sek | |
| Estensjoni | 72℃ | 30 sek/kb | |
| Denaturazzjoni | 98℃ | 10 sek |
20 |
| Ittemprar | 55℃ | 20 sek | |
| Estensjoni | 72℃ | 30 sek/kb | |
| Estensjoni finali | 72℃ | 5 min | 1 |
Karatteristiċi taħt protokoll ta 'amplifikazzjoni differenti
| Protokol | Żewġ Passi | Tliet stadji | Ittemprar tal-gradjent |
| Speċ. | malajr | medju | bil-mod |
| Speċifiċità | għoli | medju | għoli |
| Rendiment tal-PCR | medju | għoli | medju |
| Rata ta' skoperta | għoli | medju | għoli |
Noti
Jekk jogħġbok ilbes il-PPE meħtieġ, kowt tal-laboratorju u ingwanti bħal dawn, biex tiżgura s-saħħa u s-sigurtà tiegħek!
