RT-LAMP Kolormetriku (boċċa lijofilizzata)
Dan il-prodott fih buffer tar-reazzjoni, RT-Enzymes Mix (Bst DNA polymerase u reverse transcriptase reżistenti għas-sħana), protettivi lajofilizzati u komponenti taż-żebgħa kromoġeniċi.Il-prodott huwa tip ta 'ballun lajofilizzat, bl-użu biss ma' primers u mudelli.Dan il-kit jipprovdi skoperta viżwali veloċi u ċara ta 'amplifikazzjoni, liema reazzjoni negattiva hija indikata bl-aħmar u reazzjoni pożittiva hija indikata b'bidla għal isfar.
Komponent
RT-LAMP Taħlita Master Kolormetrika (żibeġ lajofilizzati)
Applikazzjonijiet
Għal amplifikazzjoni iżotermika tad-DNA jew RNA.
Kundizzjonijiet tal-Ħażna
Trasportat u maħżun f'2 ~ 8℃.Il-prodott huwa validu għal 12-il xahar.
Protokoll
1.Oħroġ in-numru korrispondenti trab taż-żibeġ lijofilizzat skond in-numru ta 'testijiet.
2.Ipprepara taħlita ta' reazzjoni
Komponent | Volum |
RT-LAMP Taħlita Master Kolormetrika (żibeġ lajofilizzati) | biċċa 1 (2 żibeġ) |
10 × Primer Taħlitaa | 5 μL |
Mudelli DNA/RNA b | 45 μL |
Noti:
1. 10×Konċentrazzjoni tat-Taħlita tal-Primer: 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2. Il-mudelli tal-aċidu nuklejku huma rrakkomandati li jiġu maħlula bl-użu tal-ilma DEPC.
3.Inkuba f'65 ° C għal 30-45 minuta, li tista 'tiġi estiża b'mod xieraq skond il-bidla fil-kulur Ħin ta' reazzjoni.
4.Skont l-għajn, isfar kien pożittiv u aħmar kien negattiv.
Noti
1.It-temperatura tar-reazzjoni tista 'tiġi ottimizzata bejn 62 ℃ u 68 ℃ skont il-kundizzjoni tal-primer.
2.Ir-reaġenti ppakkjati m'għandhomx ikunu esposti għall-arja għal żmien twil.
3.Ir-reazzjoni ta 'skulurazzjoni ħamra u safra tiddependi fuq il-bidla fil-pH tas-sistema ta' reazzjoni, jekk jogħġbok tużax is-soluzzjoni ta 'ħażna ta' aċidu nuklejku li fiha Tris, rakkomandat li tuża ddH2O aċidu nuklejku maħżun.
4.L-esperiment għandu jitwettaq b'mod standardizzat, inkluż il-preparazzjoni tas-sistema ta' reazzjoni, it-trattament tal-kampjun u ż-żieda tal-kampjun.
5.Huwa ssuġġerit li tipprepara sistema ta 'reazzjoni fit-tabella ultra-nadifa u żżid mudelli fil-kappa tad-dħaħen ta' kmamar oħra biex tevita falza.