Ultra Nuclease grad GMP
Cat Nru: HC2016A
UltraNuclease GMP-grad huwa espress u purifikat f'Escherichia coli (E.coli) minn inġinerija ġenetika u ppreparati taħt l-ambjenti GMP.Jista 'jnaqqas il-viskożità ta' supernatant taċ-ċelluli u lisat taċ-ċelluli fir-riċerka xjentifika, iżid l-effiċjenza tal-purifikazzjoni tal-proteini u jtejjeb ir-riċerka funzjonali tal-proteini.Il-prodott jista 'wkoll inaqqas ir-residwi ta' l-aċidu nuklejku ospitanti għal pg-grad, itejjeb il-prestazzjoni u s-sigurtà ta 'prodotti bijoloġiċi ta' applikazzjonijiet inklużi purifikazzjoni tal-virus, manifattura ta 'vaċċini, u manifattura farmaċewtika ta' proteini/polisakkaridi.Barra minn hekk, il-prodott jista 'jiġi applikat ukoll biex jipprevjeni l-ġbir taċ-ċelluli mononukleari tad-demm periferali tal-bniedem (PBMC) fit-terapija taċ-ċelluli u l-iżvilupp tal-vaċċini.
UltraNuclease huwa pprovdut fil-forma ta 'reaġent sterilizzat, eluwit f'buffer (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% gliċerina), bid-dehra ta' likwidu trasparenti u bla kulur.Dan il-prodott huwa prodott minn rekwiżiti tal-proċess GMP u pprovdut f'forma likwida.
Komponenti
UltraNuclease grad GMP (250 U/μL)
Kundizzjonijiet tal-Ħażna
Il-prodott jintbagħat bis-silġ niexef u jista 'jinħażen f'-25 ℃ ~ -15 °C għal sentejn.
Jekk il-prodott jinfetaħ u jkun inħażen f'4℃ għal aktar minn ġimgħa, nirrakkomandaw li tiffiltrail-prodott biex jipprevjeni l-kontaminazzjoni mikrobjali.
Speċifikazzjonijiet
| Espressjoni Ospitanti | E. coli rikombinanti bil-ġene UltraNuclease |
| Piż Molekulari | 26.5 kDa |
| punt soelettriku | 6.85 |
| Purità | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Buffer tal-Ħażna | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% gliċerina |
|
Definizzjoni ta' Unità | Id-definizzjoni ta' unità ta' Attività waħda (U) hija l-ammont ta' enzima użata għalihaibdel il-valur ta' assorbiment ta' ΔA260 b'1.0 fi 30 minuta fi 2. 625 mLsistema ta 'reazzjoni f'37 ℃ b'pH ta' 8.0 (ekwivalenti għal diġestjoni kompluta ta '37 μg DNA ta' l-isperma tas-salamun f'oligonukleotidi). |
Istruzzjonijiet
1. Kampjun Ġbir
Ċelloli aderenti: neħħi l-medju, aħsel iċ-ċelloli bil-PBS, u neħħi s-supernatant.
Ċelluli ta' sospensjoni: iġbor iċ-ċelloli permezz ta' ċentrifugazzjoni, aħsel iċ-ċelloli b'PBS, ċentrifuga f'6,000rpm għal 10 min, iġbor il-pellet.
Escherichia coli: iġbor il-batterja biċ-ċentrifugazzjoni, aħsel darba b'PBS, ċentrifuga fi 8,000rpm għal 5 min, u iġbor il-pellet.
2. Trattament tal-Kampjun
Ittratta l-gerbub taċ-ċelluli miġbura b'liżi buffer fil-proporzjon tal-massa (g) għall-volum (mL) 1: (10-20), jew b'metodi mekkaniċi jew kimiċi fuq is-silġ jew f'temperatura tal-kamra (1g ta 'pellet taċ-ċelluli fih madwar
109 ċellula).
3. Trattament ta 'enżimi
Żid 1-5mM MgCl mas-sistema ta' reazzjoni u aġġusta l-pH għal 8-9.
Żid UltraNuclease skont il-proporzjon ta '250 Unità biex tiddiġerixxi 1 g ta' gerbub taċ-ċelluli, inkuba f'37 ℃ għal aktar minn 30 minuta.Jekk jogħġbok irreferi għall-formola "Ħin ta' Reazzjoni Rakkomandat" biex tagħżel il-it-tul tat-trattament.
4. Supernatant Ġbir
Iċċentrifuga fi 12,000 rpm għal 30 minuta u iġbor is-supernatant.
Nota: Jekk is-soluzzjoni hija aċiduża jew alkalina, jew fiha konċentrazzjonijiet għolja ta 'melħ, deterġenti, jewdenaturanti, jekk jogħġbok żid id-dożaġġ tal-enżimi jew testendi l-ħin tat-trattament kif xieraq.
Kundizzjoni ta' reazzjoni rakkomandataons
| Parametru | Kundizzjoni Ottimi | Kundizzjoni Effettiva |
| Mg²+Konċentrazzjoni | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatura | 37℃ | 0-42℃ |
| Konċentrazzjoni DTT | 0-100 mM | > 0 mM |
| Konċentrazzjoni tal-mercaptoethanol | 0-100 mM | > 0 mM |
| Konċentrazzjoni ta' katjoni monovalenti | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Konċentrazzjoni ta' fosfat | 0-10 mM | 0-100 mM |
Irrakkomandat Reazzjoni Ħin (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Ammont UltraNuclease (Konċentrazzjoni Finali) | Ħin ta' Reazzjoni |
| 0.25 U/mL | > 10 h |
| 2.5 U/mL | > 4h |
| 25 U/mL | 30 min |
Noti:
Jekk jogħġbok ilbes il-PPE meħtieġ, kowt tal-laboratorju u ingwanti bħal dawn, biex tiżgura s-saħħa u s-sigurtà tiegħek!
