DNase I (Ħieles minn Rnase) (2u/ul)
Cat Nru: HC4007B
DNase I hija endonukleażi li tista' tiddiġerixxi DNA b'linja waħda jew doppja.Jista 'jidrolizza bonds fosfodiesteri biex jipproduċi mono-u oligodeoxynucleotides li fihom grupp 5'-fosfat u grupp 3'-OH.L-aħjar firxa ta 'pH tax-xogħol ta' DNase I hija 7-8.L-attività tad-DNase I tiddependi fuq Ca2+u jistgħu jiġu attivati minn joni tal-metall divalenti bħal CO2, Mn2+, Zn2+, eċċ Fil-preżenza ta’ Mg2+, DNase I jista' b'mod każwali jaqsam kwalunkwe sit ta' DNA bi stranded doppju;Filwaqt li fil-preżenza ta’ Mn2+, DNase I tista 'taqsam DNA double-stranded fl-istess sit, li jiffurmaw truf ċatti jew truf li jwaħħlu b'1-2 nukleotidi jisporġu 'l barra.Jista 'jintuża għall-ipproċessar ta' diversi kampjuni ta 'RNA.
Komponenti
| Isem | 1KU | 5KU |
| DNaseI rikombinanti (mingħajr RNase) | 500 μL | 5 × 500 μL |
| Buffer ta' Reazzjoni DNase I (10×) | 1 mL | 5 × 1mL |
Kundizzjonijiet tal-ħażna
Dan il-prodott għandu jinħażen f'-25 ~ -15 ℃ għal sentejn.Jekk jogħġbok evita iffriżar-tidwib ripetut.
Istruzzjonijiet
Applikat għat-tneħħija tad-DNA minn kampjuni tal-RNA bħala referenza biss.
1. Jekk jogħġbok uża tubi ċentrifugi mingħajr RNase u ponot tal-pipetta biex tħejji s-sistema ta 'reazzjoni li ġejja:
| Komponenti | Volum (μL) |
| Buffer ta' Reazzjoni DNase I (10×) | 1 |
| DNasel rikombinanti (mingħajr RNase) | 1 |
| RNA | X |
| ddH ħielsa minn RNase2O | Sa 10 |
2. Il-kundizzjonijiet ta 'reazzjoni huma kif ġej: 37 ℃, wara 15-30 minuta, żid konċentrazzjoni finali ta' soluzzjoni EDTA 2.5 mM u ħawwad sew, imbagħad 65 ℃ għal 10 minuti.Il-mudell ipproċessat jista 'jintuża għal esperimenti RT-PCR jew RT-qPCR sussegwenti, eċċ.
Noti
1. DNase l huwa sensittiv għad-denaturazzjoni fiżika;Meta tħallat, aqleb bil-mod it-tubu tat-test uħawwad sew, tħawwadx bil-qawwa.
2. L-enzima għandha tinħażen f'kaxxa tas-silġ jew fuq banju tas-silġ meta tintuża, u għandha tinħażen f'-20 ℃ immedjatament wara l-użu.
3. Dan il-prodott huwa għal użu ta 'riċerka biss.
4. Jekk jogħġbok operat b'kowtijiet tal-laboratorju u ingwanti li jintremew, għas-sigurtà tiegħek.
